2026届高考:高中生物课本知识点回顾(选择性必修部分)
《选必一》
1.血红蛋白、呼吸酶、丙酮酸、消化酶不属于内环境中成分;乳酸、神经递质属于内环境成分;
2.血浆渗透压大小主要与无机盐和蛋白质有关;细胞外液渗透压主要与Na+和Cl-有关;细胞内液的渗透压维持与K+密切相关。
3.血浆pH之所以保持稳定,与其含有的HCO3-、H2CO3和H2PO4-、HPO42-等物质有关。
4.内环境稳态的实质是各种化学成分和理化性质处于相对稳定。
5.神经-体液-免疫调节网络是集体维持稳态的主要调节机制。
6.调节呼吸、心脏功能的基本活动中枢位于脑干中,感觉中枢位于大脑皮层;调节运动的低级中枢位于脊髓中。
7.支配内脏、血管和腺体的传出神经,它们的活动不受意识支配,称为自主神经系统。(并非不受大脑控制)
8.感觉神经=传入神经,运动神经=传出神经;
9.兴奋时,交感神经活动占优势:瞳孔大,心跳快,血压高,支气管扩张,尿滞留,肠胃蠕动弱,安静时,副交感神经活动占优势:瞳孔小,心跳慢,支气管收缩,膀胱缩小,肠胃蠕动强
10.效应器:传出神经末梢及其支配的肌肉或腺体
11.刺激传出神经,产生反应不属于反射。产生感觉也不属于反射。(都没有完整反射弧参与)
12.非条件反射:出生后就具有的反射;条件反射:经过训练才能形成的反射。(条件反射建立后要维持下去,还需要非条件刺激的强化)
13.条件反射的形成需要大脑皮层参与,消退也需要大脑皮层的参与。
14.条件反射使机体具有更强的预见性、灵活性和适应性,提高动物应对复杂环境变化的能力。
15.神经递质通过突触间隙扩散到突触后膜;神经递质与突触后膜上的受体结合,突触后膜上的离子通道发生变化,引发电位变化。(兴奋性神经递质和抑制性神经递质都会使膜电位发生变化)
16.由于突触处的兴奋传递需要通过化学信号的转换,因此兴奋传递的速度比神经纤维上要慢。
17.神经递质种类:乙酰胆碱、某些氨基酸、5-羟色胺、多巴胺、NO、去甲肾上腺素、肾上腺素等。膜外K+减少,静息电位绝对值增大;膜外Na+增多,动作电位峰值增大。
18.躯体各部分运动调控在大脑皮层上的分布是倒立的,面部运动调控在大脑皮层上的分布是正立的。范围大小与躯体运动的精细程度有关。
19.语言功能是人脑特有的高级功能。
20.外分泌腺:分泌物经导管排出;内分泌腺:没有导管,分泌物激素直接进入腺体内的毛细血管,并随血液循环运输到全身各处。
21.甲状腺激素具有调节机体内有机物代谢、促进生长发育、提高神经的兴奋性。
22.肾上腺皮质分泌醛固酮、皮质醇等,调节水盐代谢和有机物代谢;肾上腺髓质分泌肾上腺素,提高机体的应激能力。
23.蛋白质、多肽类激素不能口服;
24.糖皮质激素、肾上腺素、甲状腺激素,胰高血糖素都可以使血糖升高。下丘脑兴奋通过交感神经使胰岛A细胞分泌胰高血糖素。
25.反馈调节:系统本身的工作效果,反过来作为信息调节系统的工作(维持稳态具有重要意义)
26.分级调节:下丘脑、垂体、靶腺体之间存在的分层调控(可以放大激素调节效应,形成多级反馈,有利于精细调控,从而维持机体稳态)。甲状腺激素、性激素、糖皮质激素分泌存在分级调节。
27.临床上给患者输O2时,往往采用含有5%左右的CO2的混合气体,以达到刺激呼吸中枢目的。
28.体温升高,产热量>散热量;体温维持在某一值,产热量=散热量。寒冷环境中,散热多,产热也多;炎热环境中,散热少,产热也少。
29.抗利尿激素由下丘脑分泌,垂体释放,促进肾小管和集合管对水的重吸收,使尿量减少。
30.大量丢失水分使细胞外液量减少以及血钠低时,肾上腺皮质分泌的醛固酮增加,促进肾小管和集合管对Na+的重吸收。
31.免疫活性物质由免疫细胞或其他细胞产生的发挥免疫作用的物质。
32.外分泌液中的杀菌物质属于第一道防线;体液中的杀菌物质属于第二道防线。
33.B细胞在骨髓中成熟,T细胞在胸腺中成熟,它们都是由骨髓中造血干细胞增殖分化产生。
34.抗原呈递细胞(APC)包括:树突状细胞、巨噬细胞、B细胞。
35.一种抗体只能与一种抗原特异性结合,一种浆细胞只能产生一种抗体。
36.抗体的化学本质是蛋白质,但抗原的化学本质不一定是蛋白质(可以是糖类脂质等)。
37.免疫防御:外来抗原性异物(功能异常,容易感染病原体,免疫缺陷病);免疫自稳:清除衰老损伤细胞(功能异常,容易发生自身免疫病);免疫监视:识别和清除突变细胞(功能异常,有肿瘤发生)。
38.B细胞活化需要两个信号刺激:一些病原体可以和B细胞接触;辅助性T细胞表面的特定分子发生变化并与B细胞结合。辅助性T细胞产生细胞因子加速B细胞增殖、分化
细胞毒性T细胞活化:靶细胞刺激;辅助性T细胞产生细胞因子加速细胞毒性T细胞增殖、分化。
39.注射疫苗,主要成分属于抗原,可以预防,属于主动免疫;
注射抗毒素,主要成分属于抗体,属于被动免疫。
40.受体一般是蛋白质分子,不同受体的结构各异,因此信号分子与受体结合具有特异性。
41.HIV是逆转录病毒,含有包膜(主要成分与细胞膜相似);
42.只要供者与受者的主要HLA有一半以上相同,就可以进行器官移植。
43.植物激素是由植物体内产生的;植物生长调节剂是由人工合成的。
44.生长素的发现历程,各科学家的实验及结论。
45.色氨酸可以经过一系列反应转变生成生长素;
46.生长素的两重性:顶端优势、根的向地性(向光性和茎的背地性没有体现)
47.生长素的运输方向:在胚芽鞘、芽、幼叶和幼根中极性运输(主动运输);在成熟组织可以通过输导组织进行非极性运输。
48.激素不具有催化作用,不为细胞提供能量,而是给细胞传达信息,起着调节作用。
49.乙烯促进果实成熟,生长素、赤霉素可以促进果实发育。
50.脱落酸抑制种子萌发,促进气孔关闭,赤霉素促进种子萌发
51.决定器官生长发育的,往往不是某种激素的绝对含量,而是不同激素的相对含量。
52.生长素促进细胞核的分裂,细胞分裂素促进细胞质的分裂。
53.植物生长调节剂的优点:原料广泛、易合成、效果稳定。
54.光作为一种信号,影响、调控植物生长、发育全过程。光敏色素是接受光信号的分子,受到光照射时,光敏色素结构会变化,会经过信息传递系统传导到细胞核,影响特定基因表达。
55.光敏色素(一类蛋白质,色素-蛋白复合体)主要吸收红光和远红光,植物体内还有感受蓝光的受体。
56.植物生长发育的调控,是由基因表达调控、激素调控和环境因素调节共同完成的。
《选必二》
1.调查范围较小,个体较大的种群密度,可以逐个计数法;调查趋光性昆虫,可以黑光灯诱捕法;
调查植物或活动能力弱的动物,可以用样方法;调查活动能力强的动物,可以用标记重捕法;
调查生活隐蔽、复杂环境中的动物,特别是猛禽和猛兽,可以用红外触发相机拍摄法;
调查土壤小动物物种丰富度,可以用取样器取样法。
2.种群研究的核心是种群的数量特征和数量变化规律。
3.出生率和死亡率、迁入率和迁出率直接决定种群密度,年龄结构影响出生率和死亡率,性别比例影响出生率。
4.环境容纳量:一定环境条件所能维持的种群最大数量。(环境容纳量大小取决于环境条件,并不是固定不变的)
5.S形增长:K/2时种群增长速率最大,K时增长速率为0。海洋捕捞时,捕捞后种群数量维持在K/2,而不是在k/2时捕捞。
6.当一个种群的数量过少,种群可能会由于近亲繁殖等而衰退、消亡。
7.食物和天敌等生物因素对种群数量的作用强度与该种群的密度是相关的,这些因素称为密度制约因素。气温和干旱等气候因素以及地震、火灾等自然灾害,对种群的作用强度与该种群的密度无关,这些因素被称为非密度制约因素。
8.认识一个群落,首先要分析群落的物种组成。区分不同群落的重要特征是物种组成。群落中的物种组成不是固定不变的。
9.一个群落中的物种数目,称为物种丰富度。物种组成≠物种丰富度
10.原始合作(互惠):共同生活在一起,彼此有益,但分开后各自也能独立生活。
互利共生:长期共同生活在一起,相互依存,彼此有利。
种间竞争:两种或多种生物共同利用同样有限的资源和空间而产生的相互排斥现象。
11.群落的形成是不同物种协同进化的结果。
12.垂直方向上明显分层——垂直结构,水平方向上呈镶嵌分布——水平结构。
13.植物的垂直分层提高了群落利用阳光等环境资源的能力,为动物创造了多种多样的栖息空间和食物条件。
14.决定植物地上分层环境因素:光照、温度等;决定植物地下分层环境因素:水分、无机盐等。
15.由于阳光、温度和水分等随季节而变化,群落的外貌和结构也会随之发生有规律的变化。
16.生态位是指一个物种在群落中的地位或作用,包括空间位置、占用资源情况和其他物种的关系等。同一个群落中不存在完全相同的生态位。
17.研究动物生态位:栖息地、食物、天敌以及与其他物种的关系
研究植物生态位:出现频率、种群密度、植株高度等
18.生态位重叠:当两个物种利用同一资源就会发生生态位重叠。资源短缺时发生竞争,竞争优势大的物种会把另一物种完全排除掉。也可能某一物种在进化中出现生态位分化,避免利用相同资源或错开利用相同资源的时间等。
19.森林中,许多动物需要植物提供食物和庇护,不少植物则依赖动物传播花粉和种子。
20.群落演替:随着时间的推移,一个群落被另一个群落代替的过程。(物种组成会改变,但是不一定是某个物种消失)
21.群落演替的影响因素。
22.沙丘、火山岩、冰川泥上的演替属于初生演替。由于原来土壤条件基本保留,甚至保留了植物种子或其他繁殖体,所以次生演替速度快。群落演替最终都会达到一个与群落所处环境相适应的相对稳定的状态。
23.人类活动往往会使群落按照不同于自然演替的进程和方向进行。(是否改变方向要结合题干情境)
24.生态系统的结构包括:组成成分和营养结构。组成成分包括:生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量。营养结构:食物链和食物网。
25.生产者:(植物)将太阳能固定在制造的有机物中,可以被自身和其他生物利用。
消费者:加快生态系统物质循环,帮助植物传粉和传播种子。
分解者:将动植物的遗体和动物的排遗物分解成无机物。
26.(不强调的情况下只考虑捕食食物链)食物链起点一定是生产者。食物链中不包括分解者和非生物的物质和能量。
27.生态系统功能:物质循环、能量流动和信息传递。物质循环和能量流动沿着食物链(网)进行。
28.能量流动:生态系统中能量输入、传递、转化和散失的过程。输入生态系统总能量:生产者固定太阳能(可能还有人工投入的能量)。
29.摄入量=粪便量+同化量,粪便量属于上一个营养级的同化量,由于粪便中的有机物会被分解者分解可以认为是上一营养级间接流向分解者的能量。
30.某一营养级同化量=自身呼吸作用消耗的能量+用于自身生长、发育和繁殖的能量=自身呼吸作用消耗的能量+流向下一营养级的能量+流向分解者的能量+未利用的能量。
31.能量传递效率=下一营养级从上一营养级获得的能量(不考虑人工投入能量)÷上一营养级总的同化量(要考虑人工投入能量)×100%。
32.能量流动特点:单向流动(自然选择决定捕食关系不可逆转,生物不能利用最终散失的热能)、逐级递减。相邻两营养级之间(不一定是两种生物之间)能量传递效率10%—20%之间。
33.任何生态系统都需要不断得到来自系统外的能量补充。
34.能量不能循环利用,物质能够循环利用。
35.自然生态系统中能量金字塔只能正立,数量金字塔和生物量金字塔一般正立,在某些特定情境下可能倒立。
36.研究能量流动意义:①帮助人们将生物在时间、空间上合理配置,增大流入生态系统的总能量。(间作套种、立体农业)②实现能量的多级利用,提高能量利用率。(废弃物再利用)③合理调整能量流动关系,使更多能量流向对人类有益的方向。
37.物质循环:组成生物体的C、H、O、N、P、S等元素,都不断从非生物环境到生物群落,又从生物群落到非生物环境的过程。实质上是元素循环。具有全球性和循环性。
38.生物富集:生物体从周围环境吸收、积蓄某种元素或难以降解的化合物,使其在体内浓度超过环境浓度的现象。(食物链顶端生物积累有害物质最多)
39.信息传递意义:①生物个体生命活动正常进行,离不开信息传递。②生物种群的繁衍离不开信息传递。③调节种间关系,维持生态系统的平衡和稳定。
40.行为信息——动物的特殊行为,化学信息——传递某种信息的化学物质;
41.生物防治:利用生物的天敌、竞争者或者生物的信息来防治有害生物的手段。优点:对环境无污染、不会危害其他生物、不会产生抗药性作用效果持久等。
42.生态平衡:生态系统结构和功能处于相对稳定的一种状态。特征:结构平衡、功能平衡和收支平衡。
43.生态系统维持相对稳定是因为具有自我调节能力,自我调节能力的基础是负反馈。
44.生态系统的稳定性:生态系统维持或恢复自身结构与功能处于相对平衡状态的能力。一般来说,生态系统中组分越多,食物网越复杂,其自我调节能力越强,抵抗力稳定性越高。
45.生态足迹值越大,代表人所需要的生产资源和吸纳废物的土地和面积越多,对生态和环境影响越大。
46.直接价值:对人类而言的价值(或者能用金钱衡量);间接价值:对生态系统(所有生物)而言的价值;潜在价值:人类尚未弄清楚的价值。
47.人类活动对野生物种生存环境的破坏,主要表现为使某些物种的栖息地丧失和碎片化。
48.生物多样性保护:就地保护、易地保护、建立精子库、种子库、基因库等生物技术进行保护、建立法规等。
49.生态工程原理:自生、整体、协调、循环。
自生:提高生物多样性、创造有利环境条件,强调生物组分的自组织
循环:废弃物循环利用,减少废弃物
协调:生物与生物,生物与环境相适应,生物数量不超过环境承载量,强调关系
整体:强调对社会和经济的影响。
(不用太纠结,考试会考明显的易区分的或者是课本的例子)
《选必三》
1.(果酒)酒精发酵和(泡菜)乳酸发酵都在无氧条件进行;(果醋)醋酸发酵在有氧条件进行。
2.醋酸菌是好氧菌,O2、糖源都充足时,将糖分解为乙酸;缺少糖源时,将乙醇转化为乙醛,再将乙醛转化为乙酸。(反应式会默写)
3.固体培养基:含凝固剂——琼脂,可以分离微生物,观察菌落特征;
液体培养基:不含琼脂,可以对微生物扩大培养。
4.培养基的主要营养物质:碳源、氮源、水和无机盐。有些培养基还需要满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。培养乳酸杆菌,培养基中添加维生素;培养霉菌,培养基一般调至酸性;培养细菌,培养基一般调至中性或弱碱性。
5.消毒——杀死表面或内部的一部分微生物;灭菌——杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
6.牛奶——巴氏消毒法(杀死大多数微生物,并且不会破坏牛奶营养成分);接种室、接种箱或超净工作台——紫外线消毒;培养基——高压蒸汽灭菌(湿热灭菌);玻璃器皿,金属用具——一般干热灭菌(也可以湿热灭菌);涂布器、接种环、试管口、瓶口——灼烧灭菌。
7.微生物培养包括:配制培养基、灭菌、接种、分离和培养。
8.倒平板:待培养基冷却至50℃左右,在酒精灯附近倒平板。倒入培养皿中的培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来。(防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,防止水分过快挥发)
9.接种后的培养基和未接种的培养基对照,可以判断培养基灭菌是否彻底。
10.平板划线法可用于微生物分离;稀释涂布平板法可用于微生物分离和统计活菌数。
11.平板划线法中,接种环灼烧次数=划线次数+1。最后一次划线不能与第一次划线相连。
12.稀释涂布平板法一般选择菌落数30-300的平板计数,至少对3个平板进行重复计数,然后求平均值。计算公式:平均菌落数÷培养基上接种菌液体积×样液稀释倍数。
13.稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少,原因:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
14.显微镜进行直接计数统计的是活菌数和死菌数之和。酵母菌、霉菌用血细胞计数板计数,细菌用细菌计数板计数。
15.鉴别纤维素分解菌的培养基中要加刚果红,鉴别尿素分解菌的培养基中要加酚红,鉴别大肠杆菌的培养基中要加伊红—亚甲蓝。
16.选择纤维素分解菌培养基中以纤维素为唯一碳源,选择尿素分解菌培养基中以尿素为唯一氮源,选择石油分解菌培养基中以石油为唯一碳源。
17.单细胞蛋白:发酵获得的大量微生物菌体。
18.植物组织培养技术的原理:植物细胞具有全能性,包括脱分化和再分化两个阶段。脱分化过程避光,再分化过程有光照,先生芽再生根。
19.愈伤组织:失去其特有结构和功能,转变为未分化的细胞,进而形成不定形的薄壁组织团块。
20.植物组织培养中需要生长素和细胞分裂素,不同阶段要考虑其浓度和比例。生长素多,诱导根的分化;细胞分裂素多,诱导芽的分化;两者比例适中,诱导愈伤组织的形成。
21.植物体细胞杂交技术中,去除细胞壁用纤维素酶和果胶酶。诱导原生质体融合的方法:电融合法、离心法、聚乙二醇融合法、高Ca2+-高pH融合法。融合成功的标志是再生出细胞壁。意义:打破生殖隔离,实现远缘杂交育种。
22.作物脱毒:植物顶端分生区附近病毒极少,甚至无病毒,可以切取茎尖进行组织培养。
23.初生代谢:生物生长和生存所必需的代谢活动;次生代谢:不是生长所必需的,一般在特定的组织或器官中进行。
24.动物细胞培养基中需要加入动物血清,一般使用液体培养基,通入CO2是为了维持培养液pH的相对稳定。
25.用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理动物组织,可以分散成单个细胞。
26.体外培养的细胞有两类:悬浮在培养液中的细胞、贴附于某些基质表面的细胞。悬浮细胞会因细胞密度过大,有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。不会出现接触抑制现象,传代培养时直接用离心法收集。(贴壁生长细胞需要胰蛋白酶处理后再离心法收集)
27.原代培养:动物组织经处理后的初次培养。传代培养:分瓶后的细胞培养。
28.制备iPS细胞包括借助载体将特定基因导入细胞中,直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。
29.诱导动物细胞融合常用的方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。(诱导原生质体融合不能用灭活病毒诱导)
30.单克隆抗体制备中,注射抗原是获得能产生特定抗体的B淋巴细胞。
31.第一次筛选:选择培养基(HAT培养基),未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,筛选出杂交瘤细胞;第二次筛选:克隆化培养和抗体检测,筛选出既能无限增殖,又能产生能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
33.用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞,每个孔尽量只接种1个杂交瘤细胞。
34.单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,可大量制备。
35.抗体与药物偶联(ADC),其中抗体具有导向作用,抗体与抗原特异性结合,能将药物定向运送到相应的细胞,减少药物对正常细胞的毒害,疗效高,毒副作用小。
36.动物细胞核移植技术原理:动物细胞核具有全能性。产生的动物为克隆动物,属于无性繁殖。
37.去核的卵母细胞中“核”指的是MⅡ期纺锤体—染色体复合物。去核目的:使重构胚的细胞核全部来自受体细胞。去核的方法:显微操作去核法(最常用的,紫外线短时间照射、梯度离心、化学物质处理等这是使其中DNA变性)。选卵母细胞的原因:细胞体积大,易操作,细胞质内含有促使细胞全能性表达的物质。
38.精子获能:直接利用雌性动物的生殖道使精子获能;在获能液中获能。(获能液有效成分肝素、Ca2+载体)
39.卵子准备:培养到MⅡ中期。防止多精入卵的两道防线:透明带反应、卵细胞膜反应。
40.胚胎发育早期,有一段时间在透明带内进行分裂,胚胎总体积不增加,称为卵裂期。
41.囊胚期逐渐分化,滋养层将来发育为胎盘、胎膜,内细胞团将来发育为胎儿各种组织、器官。囊胚进一步扩大,透明带破裂,胚胎从中伸展出来,称为孵化。
42.胚胎移植中,供体母本要选择遗传性状和生产能力强的,促性腺激素处理使其超数排卵;受体母本要选择健康的体质和正常繁殖能力的,同期发情(孕激素)处理使其具有与供体母本相同的生理状况。
43.胚胎移植的意义:充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能,大大缩短了繁殖周期。
44.受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应。一般选择桑葚胚或囊胚期的胚胎进行移植。
45.胚胎分割时,要选择囊胚期的胚胎对内细胞团均等分割,取滋养层做DNA分析,性别鉴定。
46.不同DNA分子能够拼接基础:不同的DNA分子都是四种脱氧核苷酸组成,都是双螺旋结构。
不同DNA分子转移到不同细胞中表达基础:遗传信息的传递都遵循中心法则,所有生物共用同一套遗传密码。
47.限制酶作用:识别双链DNA分子特定的核苷酸序列,并使每条链特定部位磷酸二酯键断裂。同尾酶:识别不同的脱氧核苷酸序列,但能切割出相同的末端。同尾酶切割产生的末端连接在一起后,因脱氧核苷酸序列已经发生改变,不能再被原限制酶切割。
48.DNA连接酶不会识别脱氧核苷酸序列,E.coliDNA连接酶能连接黏性末端和平末端,但连平末端的效率比T4DNA连接酶更低,T4DNA连接酶能连接平末端和黏性末端。(连接平末端效率低)
49.基因工程中用的载体包括:质粒(最常用)、噬菌体、动植物病毒等。质粒是一种环状双链DNA分子,独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外,用作载体的质粒都是要人工改造的。
50.DNA粗提取中,洋葱研磨液在4℃冰箱中冷藏,抑制核酸水解酶的活性,防止DNA被水解。加入预冷酒精目的是溶解蛋白质,析出DNA。卷起的白色丝状物就是粗提取的DNA。
51.DNA鉴定中,2mol/LNaCl溶液是溶解DNA;二苯胺试剂是鉴定DNA(沸水浴加热,变蓝)。
52.以mRNA为模板合成cDNA是逆转录过程,需要逆转录酶。
53.获取目的基因方法:从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、化学方法人工合成。
54.PCR技术的原理:DNA半保留复制,条件:模板DNA、dNTP(可以提供脱氧核苷酸原料和能量)、耐高温的DNA聚合酶、2种引物和含Mg2+的缓冲液等。
55.PCR技术的过程:变性(高温使DNA中氢键断裂,预变性使模板DNA彻底变性)、复性(两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合)、延伸(4种脱氧核苷酸在耐高温的DNA聚合酶作用下合成新的DNA链)。
56.引物:一小段能与DNA母链的一段碱基互补配对的短单链核酸。引物作用:DNA聚合酶不能从DNA模板链的一端直接开始合成子链,引物使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸。选择引物时,找DNA的3’端,引物往往与DNA模板链的3’端结合。
57.引物的种类:2种;引物的数量:2n-2个(引物数=新合成的DNA链数)。
58.设计引物的原则:①引物不能太短,能够与DNA中特定的脱氧核苷酸序列结合;②引物内部不能发生局部碱基互补,否则会导致自身折叠;③两种引物间不能发生局部碱基互补,否则导致两种引物结合在一起。
59.书写引物序列时,首先确定模板DNA的3’和5’端,然后确定引物应该扩增的方向再按照碱基互补配对原则去书写,别忘了有些题目中需要考虑在引物的5’端加上某限制酶识别序列。
60.用PCR技术也可以扩增mRNA,步骤:单链RNA在逆转录酶作用下得到RNA—DNA杂交分子,然后利用核酸酶H降解RNA单链,再以单链为模板利用PCR扩增DNA分子。
61.常用琼脂糖凝聚电泳来鉴定PCR的产物。电泳的原理:在电场力的作用下,不同构象的DNA分子在电场中的迁移速率不同,从而形成不同的条带。(距离加样孔越近的DNA分子质量越大,迁移速度越慢)
62.跑胶完成后,需置于紫外灯下观察和照相。条带的位置反映DNA分子的大小,荧光强度反映同种DNA分子的含量。
63.基因表达载体的构建是最核心的步骤。基因表达载体包括:启动子、终止子、目的基因、标记基因和复制原点。
64.启动子作用:位于基因上游,RNA聚合酶识别和结合的部位,驱动目的基因转录出mRNA(生物反应器中,为了让目的基因在特定细胞中表达,用特定细胞中特定基因的启动子);终止子的作用:位于基因的下游,终止转录过程。
65.标记基因作用:鉴定和筛选导入目的基因基因的受体细胞(如果标记基因是某抗生素抗性基因,选择培养基中应该加入相应抗生素来筛选)。
66.现在一般都会用双酶切法切割目的基因,优点:防止目的基因、运载体自身环化,防止目的基因与运载体反向连接。
67.选择限制酶的原则:观察目的基因,限制酶切位点不在目的基因内部,应在目的基因两端;观察运载体,限制酶切位点应该在启动子和终止子之间,还要注意某些题还要考虑目的基因转录方向,有T—DNA序列酶切位点还在T-DNA内。
68.目的基因导入受体细胞的方法:显微注射法(动物,受体细胞选择受精卵);农杆菌转化法(植物最常用的)、花粉管通道法;感受态细胞法(微生物)。
69.农杆菌转化法中,要将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中,目的:Ti质粒上的T-DNA可以将目的基因导入受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上。
70.感受态细胞:用Ca2+处理,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
71.分子水平上对目的基因检测与鉴定:PCR技术(检测目的基因是否插入染色体DNA上;检测目的基因是否转录出mRNA);抗原—抗体杂交(检测目的基因是否翻译出相应蛋白质)。
个体水平上对目的基因检测与鉴定:要针对转基因生物获得的性状选择合适的实验。
72.乳腺生物反应器:将目的基因与乳腺中特异性表达的基因的启动子结合在一起。优点:适合表达高等动物体内复杂的蛋白质,乳汁中易提取。缺点:受性别和年龄的限制。
73.蛋白质工程:改造现有蛋白质或合成一种新的蛋白质,生产的是自然界中不存在的蛋白质。根本上需要改造或合成新的基因来实现。基本思路:预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到并改变现有基因中脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需蛋白质。(利用的是中心法则)
74.将目的基因整合到受体细胞的叶绿体或线粒体基因组中,目的:受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞,外源基因导入细胞质中,不会随花粉扩散给其他植物,有效防止基因污染。(将目的基因导入雄性不育植株中,也可以防止基因污染)